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L-苯丙氨酸（PHE）

苯甲醛法
以苯甲醛和乙酰甘氨酸作用生成乙酰氨基桂皮酸， 然后催化加氫還原， 得乙酰-DL-苯丙氨酸(Ac-DL-phe), 最后經(jīng)氨基酰化酶水解， 可拆分生成L-苯丙氨酸。
利用氨基酰化酶的專一性， 只水解Ac-L-phe的酰氨鍵， 生成L-phe, 而不能水解Ac-D-phe的酰胺。 然后根據(jù)L-phe和Ac-D-phe在水中的溶解度不同進(jìn)行分離。而分離出的Ac-D-phe又可經(jīng)消旋化生成Ac-DL-phe。 再一次重復(fù)水解、分離。 依次類推， 可將Ac-DL-phe全部轉(zhuǎn)化為L-phe。
固定化氨基酰化酶的制備 將DEAE-sephadexa-50放入去離子水中充分浸泡后， 再依次用10倍量的0.5mol/L HCl和0.5mol/L NaOH溶液充分?jǐn)嚢杼幚?0min。 然后用去離子水洗至中性， 最后分別用0.1mol/L及0.01mol/L的pH=7.0的磷酸緩沖液處理1-2h, 濾干， 備用。 取經(jīng)培養(yǎng)40-50h 的米麯擴(kuò)大麯， 用其6倍量的支離子水分2次提取， 提取液用2mol/L的NaOH溶液調(diào)pH至6.7-7.0。 然后按100L酶液和1kg濕DEAE-sephadex A-50的比例混合， 于0-4℃攪拌吸附4-5h后， 過濾取DEAE-sephadexA-50, 并分別用去離子水0.1mol/L NaAc溶液、0.01mol/L 的pH=7.0的磷酸緩沖液洗滌3-4次。 過濾得固定化氨基酰化酶， 加1%甲苯放入冷庫中貯存?zhèn)溆谩?/span>
酶水解 在1000L水解罐中， 加入700L 0.1mol/L Ac-DL-phe鈉鹽溶液， 再逐步加入6mol/L的HCl調(diào)溶液pH至6.7-7.0， 再加入15-20kg固定化氨基酰化酶， 維持50℃約4h進(jìn)行酶選擇性水解反應(yīng)后， 過濾取濾液， 得酶水解液(含L-phe和Ac-D-phe混合液)。 
分離 將酶水解液用6mol/L的HCl調(diào)pH至4.8-5.1, 減壓濃縮至35L左右， 并將其放置于0℃結(jié)晶過夜， 過濾取結(jié)晶， 用10L冷乙醇洗滌， 于80℃烘干3-4h, 得L-phe粗品， 濾液和洗滌液合并， 減壓濃縮至20L左右， 得Ac-D-phe溶液， 待外消旋化后再重復(fù)進(jìn)行酶水解、分離。
Ac-D-phe的外消旋化 將Ac-D-phe溶液60L， 加入100L反應(yīng)罐中， 加入醋酐18.5L, 在25-45℃， 攪拌30min, 冷卻放置6h。 再用濃HCl調(diào)pH值至1.5-2.0, 5℃結(jié)晶過夜， 過濾取結(jié)晶， 水洗， 濾干40℃真空干燥， 得Ac-DL-phe。 
精制 在100L反應(yīng)罐中， 加入5kg L-phe粗品， 加50L去離子水， 加熱至100℃， 攪拌使其全溶， 再加入藥用活性炭0.25kg, 攪拌脫色半小時(shí)后，趁熱過濾， 濾液移入200L結(jié)晶罐中， 冷卻至40℃， 加入50L， 40℃的95%乙醇，用6mol/L的HCl調(diào)pH至5.48， 于0℃結(jié)晶過夜， 過濾取結(jié)晶，用95%乙醇洗滌， 抽干， 80℃干燥3-4h, 得L-phe成品。母液再回收。